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PCR凝胶成像实验时的安全防护

发布时间:2018-04-12 13:22:15 来源:医流商城

 对于广大实验科研工作者来说大家在做PCR凝胶成像实验时应注意以下几个问题:

 

1.EB染料的安全使用

EB(Ethidium bromide):即溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸大分子。 在302nm 紫外光激发下溴化乙锭能够放射出橙红色荧光信号,用Polaroid 底片或有CCD 成像头的凝胶成像处理系统可以捕捉拍摄这种信号。因此EB染料广泛用于分子生物学实验。

但目前认为EB染料是一种强诱变剂,具有高致癌性。因此在实验过程中一定要注意安全。实验结束后要对EB染料净化处理,以免危害人身安全及污染环境。对于含有EB染料的溶液可做如下处理:

EB含量超过0.5mg/ml:首先用水将其浓度稀释至0.5mg/ml以下;然后加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4,混匀,再加入等量的25mol/L HCl,混匀,置室温下数小时;最后加入一倍体积的2.5mol/L NaOH,混匀并废弃。

EB含量小于0.5mg/ml:首先按1mg/ml的量加入活性炭,轻摇混匀后置室温下1小时;然后用滤纸过滤溶液,并将活性碳与滤纸密封废弃。

 

2.对于紫外线的防护

    虽然适量紫外线对人体具有一定的保健作用,但对于科学工作者来说往往要接触大量的紫外辐射,因此正确的防护尤为重要。

过量过强紫外线作用于皮肤时,易引起皮肤出现红斑,水疱甚至水肿,严重的还可引起皮肤癌等。作用于眼睛可引起眼痛,流泪等进而引起各种炎症反应,严重的还可能诱发白内障。过量强紫外线作用于中枢神经系统,可引发头痛、头晕、体温升高等不适症状。