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PCR,RT-PCR,实时荧光定量PCR的区别与联系

发布时间:2018-04-12 13:21:16 来源:医流

 PCR,RT-PCR,实时荧光定量PCR的区别与联系

 

PCR(polymerasechainreaction)聚合酶链式反应在这三个技术中范畴最大,是最基本的技术。利用dna聚合酶和dna寡聚引物dna模板进行复制扩增。其它pcr技术都是pcr的衍生应用。

RT-PCRreversetranscriptionPCR)逆转录PCR是针对RNA,主要是mRNA的应用。其模板使用由RNA逆转录制得的DNA,因此得到的信息是关于RNA的。一般认为普通的RT-PCR是半定量的,即可以反映一定的剂量水平,但无法完全定量。无法完全定量的原因很多,其中很重要的一个就是循环数。循环数多后,产物的扩增偏离模板剂量变得比较不可控。解决这一问题,进行定量分析的技术就是实时PCRReal-timePCR),荧光是指一般使用的检测方式,定量是一种描述,一般就叫做实时PCR,有时也叫定量PCRquantitativePCR)。原理是在扩增早期的循环中,产物的剂量和模板的剂量呈较好的线性关系,因此产物的量可以用来描述模板的量。但这个技术的问题在于不能直接衡量模板的绝对剂量,只能通过比较来描述量。另外虽然应用于检测RNA剂量的情况较多,但实时PCRRT-PCR没有必然的联系。定量检测特定dna含量的应用也很多。